Protocolo de la transfección de GFP

by admin 05/04/2011

El uso de la proteína verde fluorescente revolucionó la biología molecular y celular; permitió a los investigadores visualizar las células y las proteínas en formas nunca antes posibles. Su impacto en la investigación científica fue tan profunda que en 2008 Osamu Shimomura ganó el Premio Nobel de química por su descubrimiento y aislamiento de GFP de medusas fluorescentes.

Definiciones

Un gen es la secuencia de ácido desoxirribonucleico de las células que se encarga de la producción de una proteína específica. Un plásmido es otro pedazo de ADN que contiene un gen de interés como GFP. La transfección es el método para introducir un plásmido en las células.

Métodos

Transfección normalmente consiste en mezclar un plásmido de ADN que contiene un gen como GFP con lípidos o sales. Las células se exponen a esta solución, que crea agujeros en la membrana celular, permitiendo que el plásmido en la célula donde el gene puede ser expresado como proteína. Kits comerciales transfection están disponibles, o los reactivos pueden hacerse en un laboratorio. La elección del método de transfección depende del tipo de células y se utilizan plásmidos. La GFP es visualizado y seguimiento con el equipo que detecta la fluorescencia.

Utiliza

GFP se une generalmente a una proteína de interés para la transfección. El Comité Nobel destacó el seguimiento de los "daños de la célula del nervio durante la enfermedad de Alzheimer" y "cómo se crean las células beta productoras de insulina en el páncreas de un embrión creciente" como ejemplos.

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