Cómo realizar una prueba de Allium Cepa

by admin 09/19/2011

Cómo realizar una prueba de Allium Cepa

Cebolla (Allium cepa) se utiliza para evaluar riesgos ambientales permitiendo desarrollar raíces entren en contacto con sustancias a ensayar. Después de la exposición suficiente, las raíces son sacadas, manchadas y maceradas para que los cromosomas de la célula pueden verse bajo un microscopio de luz. Toxicidad se evidencia si se detectan anomalías cromosómicas o anomalías de la división celular. Puntas de raíz se usan porque las células que son activamente creciendo y dividiendo, dando una buena oportunidad para ver los cromosomas durante las diferentes etapas de la división celular.

Instrucciones

Configuración de la prueba

• Quitar la piel seca exterior de 12 cebollas. Raspe la parte inferior de la cebolla alrededor de las placas inferiores sin estropear la superficie de la que surgirán las raíces.

• Vasos selectos que tienen una boca lo suficientemente amplia como para sostener la parte inferior de la cebolla sumergidos en los líquidos de prueba. Llenar los vasos con agua destilada y colocar las cebollas en los vasos en contacto con el agua. Escudo de los lados de los vasos con papel de aluminio para simular la oscuridad subterránea. Cambiar el agua diariamente.

• Examinar las bases de la cebolla después de dos días. Si han formado raíces. Evaluar el crecimiento de raíz y deseche las dos cebollas con el crecimiento más débil de la raíz.

• Establecer una segunda serie de cinco vasos de precipitados que contiene una muestra del material a ser probado, como el escurrimiento de las aguas residuales o industriales. Poner cinco cebollas en estos vasos. Los otros cinco en agua destilada conservar como prueba de controles. Permita que las raíces a crecer para otro 24 horas.

Preparación de las raíces

• Con un bisturí o cuchilla, cosecha cinco o seis ápices de cada cebolla, grabación que eran controles y que los temas de prueba. Separar las raíces de cebollas individuales en pequeños frascos etiquetados.

• Fijar puntas de raíz inmediatamente en aceto-alcohol en una proporción 1:3. Coloque las puntas de la raíz de una cebolla en un portaobjetos de microscopio y macerar en ácido clorhídrico 1N, que es lo mismo que 1 ácido clorhídrico molar, a 60 grados centígrados durante tres minutos. Consejos macerados con tinción de Fucsina fenicada, una mezcla de fenol y fucsina básica que se une a elementos en las paredes celulares para que resulte más visibles bajo microscopía de luz de la mancha.

• Agregar aceto-orceína de 2 por ciento de la mancha en ácido acético al 4 por ciento. Esto de los colores los cromosomas. Agite con la varilla de trituración. Se aplica un cubreobjetos, presionando hasta calabaza las puntas de la raíz. Sellar los bordes con esmalte de uñas secado rápido o montar permanentemente las preparaciones en bálsamo de Canadá, resina del árbol del abeto de bálsamo mezclado con aceites esenciales o xileno. Número de las diapositivas para que los resultados se registrará pero no aparente, si cada uno es un sujeto de prueba o un control.

Resultados de la grabación

• Coloque el portaobjetos en el escenario de un microscopio de luz. Examinar el campo de bajo aumento menor, a mayor aumento para examinar los cromosomas.

• Registrar las aberraciones cromosómicas en una hoja de datos, registro de información por el número codificado para cada cebolla. Son cromosomas incompleto separados o rotos, micronúcleos (núcleos extras formados cerca del final de la división celular que puede contener residuos cromosómica), anillos de cromosoma y cromosomas pegajosos y perturbados en diferentes etapas de la división celular. Cada diapositiva de la fotografía.

• Analizar los datos mediante análisis estadístico. Interpretar los resultados para evaluar si la solución es genotóxica.

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